作為一款廣泛應用于細胞生物學、組織工程及臨床診斷的倒置顯微鏡，尼康TS2系列憑借其緊湊型設計、高對比度成像技術及智能化操作界面，成為實驗室研究的理想工具。本文將從基礎操作、成像模式切換、熒光觀測技術及日常維護四個維度，系統解析TS2顯微鏡的核心使用方法。

一、基礎操作流程：標準化與人體工程學設計

TS2顯微鏡采用模塊化設計，其操作流程嚴格遵循人體工程學原則：

1.開機準備

連接電源后，啟動主電源開關（位于鏡體下端），確認系統供電正常。

調節載物臺高度至最低位置，避免物鏡觸碰樣本。

將樣本置于載物臺中央，使用專用載玻片托板（如CS-HS載玻片托板）固定，確保樣本通光孔對齊。

2.光路校準

明場模式：旋轉三孔轉換器選擇低倍物鏡（如4×），將光路切換器調至目鏡觀察位置。

光源調節：開啟透射光閘門控制桿，通過亮度調節模塊將初始光強設為60%，避免樣本過曝。

柯勒照明校準：調節聚光鏡高度至最高位置，取下目鏡直接觀察鏡筒內孔徑光闌，使其直徑約為物鏡數值孔徑（NA）的80%。例如，使用10×物鏡（NA=0.3）時，光闌直徑應調整至0.24mm。

3.聚焦與觀察

旋轉粗調旋鈕使載物臺緩慢上升，直至樣本接近物鏡（約1mm距離）。

從目鏡觀察，反向旋轉粗調旋鈕使載物臺下降，待樣本進入視野后，切換至微調旋鈕進行精細聚焦。

通過載物臺位移控制器（X-Y軸向精密位移）移動樣本，尋找目標觀測區域。

二、成像模式切換：相差與浮雕反差技術

TS2顯微鏡支持多種對比度增強技術，適用于不同樣本類型：

1.相差成像（Phase Contrast）

匹配相差環位置：4×物鏡對應PHL環，10×/20×/40×物鏡對應PH1環。

插入專用相位板，調節聚光鏡孔徑光闌至與物鏡NA匹配（如40×物鏡需關閉光闌至0.55mm）。

示例：觀察活細胞動態時，相差模式可消除染色步驟，直接呈現細胞骨架及細胞器輪廓。

2.浮雕反差成像（Emboss Contrast）

激活聚光鏡與目鏡筒的浮雕滑塊，通過右側旋鈕調節反差強度（0-10級）。

兼容玻璃與塑料培養皿，尤其適用于厚樣本（如iPS細胞球體）。

優勢：相比傳統相差技術，浮雕反差可減少光暈干擾，提供近似三維的無眩光圖像。

三、熒光觀測技術：多波段激發與噪聲控制

TS2-FL型號配備落射熒光模塊，支持DAPI、FITC、TRITC等多色熒光標記觀測：

1.操作前準備

關閉所有透射光源，切換至EPI落射照明模式。

根據熒光染料特性選擇濾色塊組：

DAPI系列：激發波長365nm（紫外光）

FITC系列：激發波長480nm（藍光）

TRITC系列：激發波長540nm（綠光）

2.成像優化

在暗室環境下操作，初始光強設為最大值，通過亮度調節模塊逐步降低至適宜水平。

使用NIS-Elements軟件進行白平衡校準及曝光參數優化，避免熒光信號飽和。

示例：觀察GFP標記的細胞時，選擇480nm激發濾光片，曝光時間控制在100-300ms。

四、日常維護與故障排除

1.清潔規范

每周使用專用鏡頭紙清潔光學表面（物鏡、目鏡、聚光鏡），避免劃傷。

每月檢查機械部件潤滑狀態，對載物臺導軌涂抹適量硅基潤滑脂。

2.關機流程

將所有光源強度歸零，關閉主機電源后斷開總電源。

旋轉物鏡轉換器至空檔位，防止灰塵沉降。

示例：長期閑置時，建議使用防塵罩覆蓋顯微鏡主體，并存放于干燥環境（濕度<60%）。

3.常見故障處理

圖像模糊：檢查物鏡是否準確處于光路中，重新校準柯勒照明。

光強不均：清潔聚光鏡及濾色塊表面，調整孔徑光闌至匹配物鏡NA。

載物臺卡滯：拆卸機械平臺，清潔導軌并重新涂抹潤滑脂。

總結

TS2顯微鏡通過集成化設計與智能化功能，顯著提升了細胞成像的效率與精度。從基礎操作到熒光觀測，研究者需嚴格遵循標準化流程，并結合樣本特性選擇合適的成像模式。定期維護與故障預防可延長設備壽命，確保長期穩定的觀測性能。